<th id="fnjdp"></th>
<noframes id="fnjdp">

<address id="fnjdp"></address>

<dl id="fnjdp"></dl>

神經退行性疾病概覽

神經退行性疾?。ㄈ绨柶澓DY (AD) 或帕金森癥 (PD))是能夠持續導致神經元細胞退化和/或死亡的慢性和衰退性疾病。此類疾病通常在老年群體中發生,癥狀包括記憶喪失、運動障礙、行為改變和日常生活困難。

許多神經退行性疾病表現為大腦中蛋白質形成和聚集異常,然而確定疾病發病及其進展所涉及的復雜病理機制仍然十分困難。改良的體外模型概括了疾病的慢性本質,結合先進的細胞模型(如原代細胞或 iPSC),可加深我們對疾病病理學和作用機制的認識,并有助于藥物發現。


了解更多信息

關鍵優勢

研究肽和藥物的誘導作用

使用無干擾型試劑研究疾病相關的神經毒性模型,獲得形態變化的相關數據

圖 1. tau 多肽聚集對神經突長度影響的慢性體外模型。將原代大鼠皮層神經元 (rCortical, Sartorius) 細胞接種到 PDL 96 孔板中(2×104個細胞/孔),在研究期間將其放置在 Incucyte? 中。接種后 8 天,用 Tau 溶解物或聚集物(肝素比例 4:1,在 37 ℃ 條件下不定時旋轉 5 天)處理細胞。對神經突生長進行自動分段和定量。Tau 聚集物造成了神經突長度(80 ± 5 對比 166 ± 3 %,2-3 次重復)出現濃度依賴性降低,非聚集的 Tau,則僅在 150 μg/mL 濃度下對神經突的形成有巨大抑制作用。

獲得動態信息

多重動力學數據,可更深入了解神經突長度和細胞健康狀態

圖 2.在帕金森病動力學模型中,羥多巴胺 (6-OHDA) 處理后細胞死亡增加同時神經突生長減少。將大鼠原代紋狀體和星形膠質細胞的共培養后接種到涂覆有 PDL 的 96 孔板中(密度分別為 2×104 和 1.5×104個細胞/孔),并使用 Incucyte? Neurolight-橙色慢病毒試劑 (Sartorius) 進行感染。在含細胞凋亡標志物 Incucyte? Annexin V綠色染料(0.5%;Sartorius)的培養基中,使用 6-OHDA (2-500 μM) 處理感染 10 天后的培養細胞。使用 Incucyte? 活細胞分析系統實時獲取熒光圖像。典型圖片顯示了用 6-OHDA(19、56 和 167 μM)和溶劑分別處理 21 天后的比較結果。時間進程和藥物反應曲線顯示,神經突長度(橙色)的濃度依賴性降低,伴隨相應的Annexin V 信號(綠色)增強,表明了藥物的決定性作用。數據表示為平均值± SEM(3 次重復測定)。

圖 3.帕金森病模型中的大腦區域特異性:與皮層區域相比,6-OHDA 可選擇性地影響黑質和紋狀體神經突生長。將大鼠原代紋狀體、黑質或皮層神經元和星形膠質細胞的共培養后接種到涂覆有 PDL 的 96 孔板中(密度分別為2×104 和 1.5×104個細胞/孔),并使用 Incucyte? Neurolight橙色慢病毒試劑 (Sartorius) 進行感染。用 6-OHDA (56-500 μM) 處理感染 10 天后的培養細胞。使用 Incucyte? 活細胞分析系統實時獲取熒光圖像。柱狀圖和藥物反應曲線顯示,藥物對不同腦區的神經突長度(橙色)的選擇性作用。溶劑數據表明了不同大腦區域神經突形成的差異性發育。數據表示為平均值± SEM(3 次重復測定)。

評估慢性疾病模型中的活動

在神經退行性疾病模型中獲取神經元活動的信息,以分析神經網絡的健康狀態

圖 4.功能評估結果表明,盡管 Tau 能夠保持神經元的連接,但卻誘導了神經元活動的喪失。將大鼠皮層神經元和大鼠星形膠質細胞 (Neuroprime?, Sartorius) 接種到鋪有 PDL 的 96 孔板中(密度分別為2×104 和 1.5×104個細胞/孔)進行共培養。使用基因編碼的鈣指示劑 Incucyte? Neuroburst橙色慢病毒 (Sartorius) 感染神經元,通過測試鈣的波動來監測自發的神經元活動。在 Incucyte? 中,每 24 小時采集一次圖像(以 3 幀每秒的速率掃描 3 分鐘)。細胞成熟功能性網絡形成(14 天)后,使用 AD 相關的肽 tau(聚集體,300 μg/mL)或蛋白磷酸酶抑制劑 OKA (50 nM) 處理細胞。圖像顯示了在一次完整掃描中的活動范圍(最大/最小熒光反應)。鈣跡線顯示了視野內所有活動對象的鈣水平波動。柱狀圖量化了活動對象的數量(1/圖)和關聯性(連接性)。這些數據顯示,與溶劑相比,tau 處理降低了活動節點的數量(1407 ± 94 對象/圖 vs. 920 ± 43 對象/圖),其平均強度分別為(13.7 ± 1.7 OCU vs. 7.2 ± 3.6 OCU),但 tau 處理不影響其關聯性(0.95 ± 0.01 vs. 0.97 ± 0.01, 2 次重復)。與之相反,OKA 降低了相較于溶劑,減少了活動節點的數量(180 ± 24 對象/圖)、平均強度(3.8 ± 0.3 OCU),以及關聯性(0.27 ± 0.02, 6 次重復)。數據表示為平均值 ± SEM。

使用基于細胞的相關模型

使用選定的體外神經退行性疾病細胞模型 - 在單一或共培養環境中可與 iPSC 源細胞或原代細胞兼容。

圖 5. 2D 和 3D AD患者來源的 iPSC 模型顯示出明顯的神經突發育和腫瘤球形成。將健康和 AD(PSEN1 突變)來源 iPSC 神經元 (Axol Bioscience) 接種到鋪有 ReadySet + SureBond 的 96 孔板(2.5×104 個細胞/孔 (2D)),或ULA96 孔板中(5×104 個細胞/孔),然后離心(250 g;10 分鐘)。等待 3 天,使細胞形成腫瘤球?(3D),并依照供應商的方案誘導神經元分化(補充劑 A+B)。2D 研究:使用 Incucyte? 軟件 (Sartorius) 自動定量神經突發育 15 天。時間進程曲線顯示,AD患者來源的 iPSC 細胞系的神經突長度比健康對照組更短(分別是 48 ± 3 mm/mm2,80 ± 3 mm/mm2,3 次重復)。3D 腫瘤球生長:使用明場分析以非干擾的方式定量球體大小差異15天。第 6 天在所選孔中加入 Matrigel? (2.25 mg/mL),然后對腫瘤球的形態和腫瘤球的發育過程進行 9 天的觀察。時間進程曲線顯示出兩種細胞系腫瘤球大小的明顯差異。圖像也顯示出健康細胞系和阿爾茲海默癥細胞系不同過程的發育能力。

訂購信息

產品

數量

商品目錄號

Incucyte??NeuroTrack分析軟件模塊

單個

9600-0010

Incucyte? 腫瘤球分析軟件模塊

單個

9600-0019

Incucyte? NeuroLight 橙色慢病毒

兩瓶(0.45 mL/瓶)

4808

Incucyte? NeuroLight 紅色慢病毒

兩瓶(0.45 mL/瓶)

4807

Incucyte? NeuroPrime橙色試劑盒

單個

4760

Incucyte? NeuroPrime紅色試劑盒

單個

4585

Incucyte? Annexin V NIR染料

1 瓶

4768

Incucyte? 大鼠神經元

1 瓶

4753

Incucyte? 大鼠星形膠質細胞

1 瓶

4586


詢價

資源

應用指南

White Paper: Improving in-Vitro Models for Alzheimer’s Disease

白皮書:阿爾茲海默癥體外模型的改進

立即下載

白皮書:揭示神經系統疾病的復雜性...

立即下載
Application Note:?Long-Term Live Cell Visualization and Quantification of Neuronal Activity

活細胞長期可視化和神經元活動的量化

立即下載

方案

Incucyte? Annexin V NIR和Incucyte? NeuroLight橙色多重染色方案

了解更多

Incucyte? 單腫瘤球分析方案

了解更多

Incucyte? 神經元活性分析

了解更多

神經突無標記分析方案

了解更多

神經突熒光分析方案

了解更多

SFN 2019 - 使用神經元和小膠質活細胞分析(2D 和 3D)改進阿爾茲海默癥疾病模型

了解更多

SFN 2017 | 活細胞長期可視化和神經元活動的量化

了解更多

SFN 2014 - 原代 IPSC 來源和永生化神經元神經突生長的動力學和無標記實時內容成像分析

了解更多

Incucyte? 神經活動試驗

了解更多

Incucyte? 神經免疫功能試驗

了解更多
spheroids

Incucyte? 3D 腫瘤球試驗

了解更多

Incucyte? 神經膠質細胞表征

了解更多

聯系我們

聯系我們

美女扒开内裤无遮挡禁18